液相色譜儀利用混合物各組分在固定相和流動相中溶解、分配或吸附等化學作用性能的差異,使各組分在作相對運動的兩相中反復多次受到上述各作用力而達到相互分離。從液相色譜儀工作流程中看到,色譜柱是實現分離的核心部件,要求柱效高、柱容量大和性能穩定。柱性能與柱結構、填料特性、填充質量和使用條件有關。
液相色譜儀常用的脫氣方法:
1、吹氦脫氣法:
利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性,在0.1MPa壓力下,以約60mL/min流速通入流動相儲液容器中10~15min,可以很有效地從流動相中排除溶解的空氣,能排除接近80%的氧氣。采用一個高效分布式噴射流裝置,一體積的氦氣可從流動相中將等體積的幾乎全部氣體排除。這意味著1L氦氣通過1L流動相就可完成排氣這個工作。液相色譜儀這種脫氣方法雖然好,但我國氦氣價格較高,很少有實驗室采用此方法。
2、加熱回流法:
此法的脫氣效果較好。在操作時要注意冷凝塔的冷卻效率,否則溶劑會丟失,混合流動相的比例會有變化。
3、抽真空脫氣法:
此法可使用真空泵,降壓至0.05~0.07MPa即可除去溶解的氣體。但是由于真空脫氣會使混合溶劑組成發生變化,從而影響到實驗的重現性,因此多用于單溶劑體系的簡單分析。
4、超聲波脫氣法:
將欲脫氣的流動相置于超聲波清洗器中,用超聲波震蕩10~20min。此法的脫氣效果Z差。
5、在線脫氣法:
現在的液相色譜儀,均可配在線脫氣機。在線脫氣機使用簡單,低故障,有效。建議購買液相色譜儀時一并購買,有的公司是作為選購件,所以與儀器公司談配置時應與之確認。