本系統主要由P3000U.UV3000U(或UV3000UD)組成，外觀美觀大方,操作便利，運行可靠，是常規分析實驗室常用的分析儀器。本系統可廣泛的用于醫藥、制藥、食品、衛生防疫、環保等多個領域。下面講講使用過程可能會遇到的癥狀及處理方法：

　　癥狀：

　　(一)保留時間變化

　　可能的原因:解決方法

　　1.柱溫變化:柱恒溫；

　　2.等度與梯度間未能充分平衡:至少用10倍柱體積的流動相平衡柱；

　　3.緩沖液容量不夠:用>25mmol/L的緩沖液；

　　4.柱污染:每天沖洗柱；

　　5.柱內條件變化:穩定進樣條件,調節流動相；

　　6.柱快達到壽命:采用保護柱；

 

　　(二)保留時間縮短

　　可能的原因:解決方法

　　1.流速增加:檢查泵,重新設定流速；

　　2.樣品超載:降低樣品量；

　　3.鍵合相流失:流動相PH值保持在3-7.5檢查柱的方向；

　　4.流動相組成變化:防止流動相蒸發或沉淀；

　　5.溫度增加:柱恒溫；

 

　　(三)保留時間延長

　　可能的原因:解決方法

　　1.流速下降:管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內氣泡；

　　2.硅膠柱上活性點變化:用流動相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱；

　　3.鍵合相流失:同前(二)3；

　　4.流動相組成變化:同前(二)4；

　　5.溫度降低:同前(二)5；

 

　　(四)出現肩峰或分叉

　　可能的原因:解決方法

　　1.樣品體積過大:用流動相配樣,總的樣品體積小于第一峰的15%；

　　2.樣品溶劑過強:采用較弱的樣品溶劑；

　　3.柱塌陷或形成短路通道:更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件；

　　4.柱內燒結不銹鋼失效:更換燒結不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品；

　　5.進樣器損壞:更換進樣器轉子；

 

　　(五)鬼峰

　　可能的原因:解決方法

　　1.進樣閥殘余峰:每次用后用強溶劑清洗閥,改進閥和樣品的清洗；

　　2.樣品中未知物:處理樣品；

　　3.柱未平衡:重新平衡柱,用流動相作樣品溶劑(尤其是離子對色譜)；

　　4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽譜):每天新配,用抗氧化劑；

　　5.水污染(反相):通過變化平衡時間檢查水質量，用HPLC級的水；

 

　　(六)基線噪聲

　　可能的原因:解決方法

　　1.氣泡(尖銳峰):流動相脫氣,加柱后背壓；

　　2.污染(隨機噪聲):清洗柱,凈化樣品,用HPLC級試劑；

　　3.檢測器燈連續噪聲:更換氘燈；

　　4.電干擾(偶然噪聲):采用穩壓電源,檢查干擾的來源(如水浴等)；

　　5.檢測器中有氣泡:流動相脫氣,加柱后背壓；

 

　　(七)峰拖尾

　　可能的原因:解決方法

　　1.柱超載:降低樣品量,增加柱直徑采用較高容量的固定相；

　　2.峰干擾:清潔樣品,調整流動相；

　　3.硅羥基作用加三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動相PH值,鈍化樣品；

　　4.同前(四)4:同前(四)4；

　　5.同前(四)35.:同前(四)3；

　　6.死體積或柱外體積過大:連接點降至低,對所有連接點作合適調整,盡可能采用細內徑的連接管；

　　7.柱效下降：用較低腐蝕條件,更換柱,采用保護柱；